靶点targets

方法及结果Methods and results

结果来源Souses of results

是TLR3、TLR4配体(文献报道还是PKR、RIG1、MDA5配体)

通过细胞信号通路试验证明帕米卡是TLR3、TLR4配体

香港InvivoGen公司检测2018.3

IL-6：产生细胞主要是单核细胞、巨噬细胞、成纤维细胞

利用抗原夹心磁珠法检测，帕米卡(100-5000BP)免疫1~5小时，小白鼠体内IL-6均显著提高，比对照组提高300倍

欣博盛生物科技公司2018.1.19；2018.2.11

IL-12P40产生细胞主要是APC细胞包括DC细胞、单核巨噬细胞、B细胞

方法同上，比对照组提高近20倍

同上

TNFα产生细胞主要是白细胞

方法同上，比对照组提高87倍

同上

IFNα产生细胞主要是单核细胞、巨噬细胞产生

方法同上，比对照组可提高60倍

同上

IFNγ产生细胞主要是NK细胞

方法同上，比对照组可提高近20倍

同上

佐剂作用：抗体显著提高，产生V细胞

肌红蛋白帕米卡免疫家兔，ELISA方法检测抗体较完全弗氏佐剂提高6倍

中科爱博公司2017.11.21

体外试验：

上调肿瘤细胞TLR3mRNA：上调A549人癌细胞和LL/2鼠癌细胞TLR3mRNA

抑制肿瘤细胞分裂和细胞数：

促进鼠癌细胞凋亡显著抑制S和G1期细胞分裂

促进人癌细胞凋亡

显著抑制S和G1期细胞分裂

抑制癌细胞增殖，减少细胞移动

帕米卡促进DC细胞成熟，上调MHC I和II分子

RT-QPCR检测帕米卡经24、48小时处理细胞后P值<0.01和0.001

抑制LL/2鼠癌细胞、A549人癌细胞分裂周期和细胞数

LL/2鼠癌细胞通过V-FITC/PI染色检测细胞凋亡率11.43%，对照组2.73% P < 0.001；

人癌细胞A549通过PI染色检测细胞到位率32.01，对照为17.11 P < 0.001

A549人癌细胞通过V-FITC/PI染色经流氏细胞仪检测细胞凋亡率20.14%，对照组0.13% P < 0.001

通过PI染色检测细胞到位率55.16，对照为46.52 P < 0.001；

抑制癌细胞CCK8繁殖，促进细胞凋亡，减少G1期细胞分裂，减少细胞移动

上调DC细胞MHC I和II分子、促进共刺激分子CD80，CD86产生

中国医学科学院药物研究所吴叶丹等信福公司林海祥 [2]